一、枝术概况

RIP（RNA Immunoprecipitation，RNA免疫力沉定）技术应用不是种中用探析细胞膜内RNA与蛋清质相互间效应的关键所在调查办法，还可以具体分析RNA通过蛋清（RBP）在转录后干预中的能力体系。

二、技术应用原里

RIP凭借对受众球蛋清的抗原把对应的RNA-球蛋清塑料物石雕文化沉淀下去，按照脱离纯化，对结合起来在塑料物上的RNA 开始RT-PCR认可或测序进行分析，结论更富生物制品学劝说力。

三、选用情况

1.知识基础系统：辨析RNA紧密结合球蛋白（如AGO2、Polycomb混合物）的模块及RNA自我调节网站。

2.重大疫情探究：比重大疫情与一切正常模本中RNA-蛋白酶互作对比分析，得知潜在的生物技术圆形标志物（如肝癌相应的lncRNA）。

3.食用的药剂联合开发：考核食用的药剂对RNA-核蛋白互作的关系，加快和提升靶点需求。

四、技术性竞争优势

1.灵敏性度较高：可加测低丰度RNA与血清的衰弱主动目的。

2.动图区间广：从极少量内部（如5×10⁷个）到繁多聚集样表均符合。

3.两组学联用：运用RNA-Seq、CLIP-Seq或ChIP-Seq，创设多维控制网格。

五、样表类型、

新鮮人体体細胞（贴壁人体体細胞/悬停人体体細胞）、冻存人体体細胞、冻存组织化、交连后人体体細胞子样本。

六、范本诉求

肿瘤细胞膜样品：约1×10^5个（可能是6个10cm皿，或以透明桌面肿瘤细胞膜手段保存于抽滤分液漏斗，或6个T75瓶）；

冻存阻止：约70mg；交连肿瘤细胞膜样表：的使用1%甲醛危害交连工作肿瘤细胞膜。

七、模板需要准备&及运输

活生殖细胞膜核模板：路程较近的能能将养在皿/T75瓶/离心分离管壁内的新鲜感生殖细胞膜核模板室温快递包裹（最迟隔天达）搬运，上海内可闪送或亲自递送，路程距离远的，可-80℃冻存生殖细胞膜核干冰搬运；

组织样本&交联后细胞样本：-80℃冻存干冰运输。

八、需给出的化学制剂

查重用ChIP级抗原。

九、进行实验时间间隔

1-2周（不富含测序）

十、某些

前因后果检验选用RT PCR时，需打造前因后果检验的位点。

零家具甲醛无污染热塑生殖神经元核具体实施环节：①在生殖神经元核皿内加入终酸度为1%的零家具甲醛无污染，37℃孵育1015分钟；②运行含[1mM PMSF，1μg/ml抑肽酶和1μg/ml pepstatin A]的寒冷DPBS清洗生殖神经元核俩次。③将生殖神经元核刮入所含蛋白质酶调节剂的2ml寒冷的DPBS中，并变更到抽滤管上，冻存寄邮。