耐药细胞株一般采用体外低浓度递增梯度结合大剂量间歇冲击的方法，诱导肿瘤细胞对特定药物产生耐药性，从而建立相应的耐药细胞系。细胞株的服务内容包括哪些？

　　

　　1、在体外，低浓度梯度递增结合大剂量间歇冲击诱导细胞产生耐药性。

　　

　　2、药物对亲代细胞和耐药细胞的IC50用2。MTT法，计算耐药指数。

　　

　　目前已知的体外建立耐药细胞株的方法有几种:高剂量药物冲击法、提高药物浓度法、提高药物浓度与高剂量药物冲击相结合法、转基因药物筛选法。其中，常用增加药物浓度法和大剂量药物冲击法建立肿瘤细胞化疗耐药模型。
 

　　

　　1、增加药物浓度的方法是指用低浓度药物刺激细胞，待细胞适应低浓度环境后，再稍微增加药物浓度，继续等待细胞适应当前环境。经过反复培养和加压，细胞终于可以在高浓度药物环境中存活。

　　

　　2、大剂量药物冲击法是在细胞培养时加入超高药物浓度的药物，但孵育时间很短，通常只有几分钟。然后，将细胞转移到无药物培养液中缓慢恢复。最后，通过重复上述步骤，筛选出高倍数耐药细胞系。

　　

　　两种方法各有利弊：增加药物浓度法的优点是耐药细胞株的药物剂量是渐进的，细胞培养的外部环境是逐渐改变的，细胞更耐受，处于更好的状态，但缺点是耐药诱导的过程需要较长时间，其化疗药物的作用方式与大剂量、短疗程化疗的临床原则不同；大剂量药物冲击诱导的优点是接近临床治疗大剂量化疗药物冲击，缺点是大剂量药物冲击诱导的药物浓度很高。由于外界环境突变，细胞培养可能难以耐受，细胞状态难以控制，耐药性不稳定。