RNA pull down实验技术

1. 实验原理

RNA pull down是体内的研究RNA与球蛋白互作的重要性的技术。该新技术是用微生物素标上离体转录的靶RNA原子，在用链霉亲和素纯化出与靶RNA紧密联系的淀粉酶质软型体，冲洗掉能够RNA紧密联系淀粉酶质质。再使用western blot实验性测试既定的RNA紧密联系淀粉酶质是不是与靶RNA紧密联系；或使用质谱仪测试可能需求出与靶RNA紧密联系的淀粉酶质。

海洋动物素与链霉亲和素间的功效是现如今已发现力度最大的非共价功效；里面纯化海洋动物素能够 在蛋白酶质化学交联剂的介导下，与已发现的是可以说全部海洋动物大氧分子偶联。因而用海洋动物素标示核酸后，能够 纯化出与该核酸整合的种种海洋动物大氧分子塑料物。

2. 实验流程

1）检测器设计制作及箭头：身体外转录或合并获取一个RNA，生物体素箭头;

2）pull down：与神经元裂解液孵育，行成RNA-淀粉酶质混合物。该混合物可与链霉亲和素磁珠紧密依照，若想把靶RNA紧密依照淀粉酶从神经元裂解液中分头离出去，历经干洗将非特女性朋友紧密依照淀粉酶质消除；另外，冲洗掉取得与靶RNA紧密依照的淀粉酶质混合物；

3）互作球蛋白酶质判定：再过程Western Blot（WB）或质谱(MS)判定球蛋白酶质。

3. 服务内容

1）身体之外转录或合成图片RNA，海洋生物素标记符号；

2）组织教育培养与组织裂解液化学合成；

3）pull down捉捕互作核蛋白；

4）Western blot手机验证互作蛋白酶；

5）MS淘汰鉴别互作蛋白酶。

4. 交付结果

1）保证简单、完整的的实践统计；

2）客观公正的原始数据和实验分析一下结果。

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